熒光分光光度計測試注意事項
更新時間:2017-11-11 點擊次數:4454次
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發光譜、發射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數,從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。應用于科研、化工、醫藥、生化、環保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學實驗等領域。
熒光強度容易受外界因素的影響,如樣品池、激發光源、溫度、溶液的pH值、溶劑性質、其它溶質、表面活性劑等都會造成熒光強度的變化。嚴格控制測試條件對熒光分析來說至關重要。
熒光分光光度計測試注意事項:
①樣品應盛在四面透光的石英比色皿(熒光池)中,如果是揮發性樣品應使用帶塞的熒光池。
②在熒光分析時,為了得到穩定可靠的數據,一般需要開機預熱氙燈大約30min。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈,預熱時間可以縮短到10min左右。對某些易感光、易分解的熒光物質,盡量采用長波長、低人射光強度及短時間光照。
③溫度變化可引起熒光強度的改變。通常降低溫度,有利于提高熒光量子產率,熒光強度增大。溫度影響熒光強度的顯著程度因樣品而異,大部分熒光物質的熒光強度受溫度影響不大,測試溫度變化不超過±3℃,對測試結果幾乎無影響。
④當熒光物質是弱酸或弱堿時,溶液的pH對熒光強度有較大影響。因為弱酸或弱堿在不同酸度中,分子和離子的電離平衡會發生改變,而熒光物質的熒光強度會因其離解狀態發生改變。
⑤分子結構中存在π-π共軛的熒光物質在極性溶劑中,熒光效率顯著增強。溶液中表面活性劑的加入能夠顯著提高熒光強度。
⑥測試過程中注意不要肉眼盯著氙燈光源看,以防對眼睛造成損傷。
⑦儀器房應注意經常通風,避免產生的臭氧在室內富集。